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液相色譜儀的分離系統由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內部拋光的不銹鋼制成,柱內徑為1~4mm,柱長(cháng)為10~50cm,柱形多為直形,內部充滿(mǎn)微粒固定相。近年來(lái),由于高性能填充劑的細?;?,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內徑為...
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出,通過(guò)檢測器時(shí),樣品濃度被轉...
制備色譜是一般由泵提供壓力,壓力在5~20bar。中低壓色譜柱與常壓柱、HPLC柱有比較大的不同:在使用是是封閉的,但是可以比較方便的打開(kāi)與調節長(cháng)度,這與中低壓色譜常常固體上樣相適應的。中低壓制備色譜柱的材質(zhì)主要有塑料柱、玻璃柱、不銹鋼柱三種。制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應對不同類(lèi)型和不同純度要求的樣品的分離,同時(shí)盡可能減少成本。低壓:一般而言,低壓適合易分離化合物,但分離時(shí)間長(cháng)很容易造成敏感化合物分解。Flash:Flash是應對低壓分離時(shí)間長(cháng)而出現的替...
高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統組成。1.進(jìn)樣系統一般采用隔膜注射進(jìn)樣器或高壓進(jìn)樣間完成進(jìn)樣操作進(jìn)樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的。2.輸液系統該系統包括高壓泵、流動(dòng)相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4X107Pa流速可調且穩定,當高壓流動(dòng)相通過(guò)層析柱時(shí),可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動(dòng)速度,這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動(dòng)相貯存錯和梯度儀,可使流動(dòng)相隨...
液相色譜技術(shù)自發(fā)明以來(lái),由于其高效、高靈敏度等特點(diǎn),得到了飛速發(fā)展。近年來(lái),伴隨著(zhù)生物技術(shù)和精細化工的發(fā)展,作為液相色譜分支的制備液相色譜也日益受到重視,成為了生物技術(shù)產(chǎn)品和研究中*的手段。制備液相色譜按照一次進(jìn)樣量的多少,可以分為3種規模,即半制備色譜、制備色譜和工業(yè)級色譜。制備色譜以生產(chǎn)純物質(zhì)為目的,在經(jīng)濟合理的前提下,規模越大越好。分析色譜與制備色譜的根本區別在于分離目的不同。分析色譜,反映的是樣品的組成,追求的是高效分離和高靈敏度,不需要收集特定的餾分,洗脫液通常作為...
液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出,通過(guò)檢測器時(shí),樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來(lái)。液相色譜儀的使用要求:1、氣泡會(huì )致使壓力不穩,重現性差,所以在使...
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