高效液相色譜分析時(shí)如何選擇流動(dòng)相？

　　高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫學(xué)、工業(yè)、農學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應用。

　　高效液相色譜儀分析時(shí)流動(dòng)相的選擇原則：

　　1.選擇色譜醇的溶劑作為流動(dòng)相

　　不要隨意加滿(mǎn)溶劑瓶。作為分析流動(dòng)相，應避免不必要的浪費，防止污染環(huán)境，危害身體健康。應該根據樣哦數量，計算需要使用的溶劑體積，添加適量流動(dòng)相到試劑瓶中作為流動(dòng)相。因為有些有機溶劑長(cháng)期放置易變質(zhì)，比如四氫呋喃在光照下就容易變質(zhì)，甲醇或乙醇長(cháng)期放置會(huì )生成酯類(lèi)，乙腈水溶液會(huì )分解為醋酸與氨，在分析時(shí)導致基線(xiàn)抬高，對一些分析，特別是質(zhì)譜分析造成影響。

　　高效液相色譜流動(dòng)相的選擇原則

　　2.配置某些酸或堿性流動(dòng)相時(shí)要考慮色譜柱的使用pH范圍

　　有些酸并不適宜作為流動(dòng)相，如鹽酸、長(cháng)期使用可能損壞泵及相關(guān)的鋼制管線(xiàn)。注意選擇合適的截止波長(cháng)的溶劑作為流動(dòng)相。

　　紫外分析時(shí)，樣品的檢測波長(cháng)至少應大于所用溶劑的截止波長(cháng)20nm上。

　　3.配置的鹽溶液一定用濾膜過(guò)濾

　　常規液相用0.45µm濾膜過(guò)濾，高效液相色譜使用0.2µm濾膜過(guò)濾。水或緩沖鹽溶液好置于棕色瓶中，以防長(cháng)菌，阻塞溶劑過(guò)濾器，降低泵的操作性能。質(zhì)譜分析不能使用不揮發(fā)性鹽作為流動(dòng)相。使用揮發(fā)性鹽作為流動(dòng)相時(shí)，在保證分析的條件下，流動(dòng)相中的鹽盡量保持低濃度。