HPLC色譜對流動(dòng)相的一般要求，常見(jiàn)故障及維護

　　色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。
 

　　高效液相色譜法的應用范圍十分廣泛，對樣品的適用性廣，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩定性的限制，幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定，因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來(lái)分析。
 

　　與氣相色譜不同的是液相色譜中流動(dòng)相亦參與組分的分離過(guò)程，其組成、比例和pH值可靈活調節，分離模式多樣。在實(shí)際操作中主要通過(guò)改變流動(dòng)相的組成來(lái)調節樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。
 

　　HPLC色譜對流動(dòng)相的一般要求，常見(jiàn)故障及維護：
 

　　流動(dòng)相就比如人體的血液，其質(zhì)量直接影響到整個(gè)系統的正常運行與否。
 

　　應該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換！一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時(shí)，使用異丙醇作為過(guò)渡溶劑。
 

　　注意溶劑的截止波長(cháng)。截止波長(cháng)是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的低波長(cháng),低于該波長(cháng)后,溶劑會(huì )有很強的紫外吸收，從而影響極限的穩定性、干擾對所分析物質(zhì)的檢測。
 

　　HPLC所使用的水必須是新鮮的和經(jīng)過(guò)0.45μm濾膜過(guò)濾過(guò)的。建議每天更換新鮮的水。長(cháng)期不用時(shí)，必須把使用水的管路用有機溶劑置換，防止長(cháng)霉。
 

　　儀器使用完后要采用適當的溶劑沖洗等方法維護色譜柱和系統。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。
 

　　儀器長(cháng)期不用時(shí)，不建議使用純乙腈封存。因為乙腈有生成聚合物的趨勢。建議使用甲醇、甲醇/水或乙腈/水封存。
 

　　當有流路堵塞時(shí)，可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類(lèi)生長(cháng)將會(huì )縮短溶劑過(guò)濾器的使用壽命，并且影響泵和系統的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH4至7)中尤其如此。